紫外可見分光光度計的應(yīng)用

紫外可見分光光度計是一種應(yīng)用廣泛的分析儀器。當(dāng)前已成為使用多、覆蓋應(yīng)用面廣的分析儀器。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機(jī)械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個方面，用來進(jìn)行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動力學(xué)研究等。因為儀器涉及到光學(xué)、電學(xué)和結(jié)構(gòu)等，所以它需要在一定的環(huán)境中應(yīng)用

(1) 定量分析

根據(jù)瑯伯-比爾定律，樣品的濃度和吸光度是成正比關(guān)系的，濃度越大，吸收值越高，所以分光光度計用的最多的還是定量分析，定量分析的種類有很多，這里介紹常用的幾種定量分析方法:

A、絕對法:絕對法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用最多的一一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=ε bC為基礎(chǔ)的分析方法，某- -物質(zhì)在一 定波長下ε值是一一個常數(shù)，石英比色皿的光程是已知的，也是- - -個常數(shù)。因此，可用紫外可見分光光度計在λ max 波長處，測定樣品溶液的吸光度值A(chǔ)。然后，根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/ε b，則可求出該樣品溶液

的含量或濃度。

B、標(biāo)準(zhǔn)法:在選定的波長處，在相同的測試條件下，分別測試標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液C標(biāo)和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標(biāo)和A樣。然后，按下式求得樣品溶液的濃度或含量。C樣=A樣/A標(biāo)XC標(biāo)

C、標(biāo)準(zhǔn)曲線法

紫外可見分光光度計常用的定量分析方法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法。即先用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一-定濃度的溶液，再將該溶液配制成一- 系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在一定波長下，測試每個標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)得濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。最后，將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制程序測得吸光度值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品溶液對應(yīng)的濃度或含量。

A、其它分析方法

除上述幾個分析方法外經(jīng)常使用的分析方法外，還有比吸收系數(shù)法、最小二乘法、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法。

(2)定性分析

如果未知物的紫外吸收光譜的最大吸收峰波長λmax、最小吸收峰波長入min、最大摩爾吸光系數(shù)ε max， 以及吸收峰的數(shù)目、位置、拐點與標(biāo)準(zhǔn)光譜數(shù)據(jù)*- -致， 就可以認(rèn)為是同- -種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質(zhì)。定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能，特別是定量分析。其它的分析都應(yīng)該是從這兩大種功能中發(fā)展出來的。